Рекомбинантный аллерген

Рекомбинантные аллергены — Аллергия

Рекомбинантный аллерген

В составе специфических аллергенов, сейчас возможно также выделить наиболее активные белковые компоненты, которые вызывают выработку IgE антител и аллергические симптомы.Например, проводя обычный тест на аллергию, выявлена сенсибилизация к аллергену пыльцы березы.

Но этот аллерген включает несколько аллергенных компонентов. Это и есть рекомбинантные аллергены. Рекомбинантные аллергены – это аллергенные молекулы, полученные методом генной инженерии, первоначально выделенные из аллергенного экстракта.

Большинство существующих рекомбинантных аллергенов экспрессированы в клетке Esherichia coli, и по своим структурным и иммунологическим свойствам полностью соответствуют натуральным протеинам.

Другие высокотехнологические системы основаны на воспроизведениирекомбинантных аллергенов в дрожжевой, бактериальной или инсектной клетке.

Рекомбинантные аллергены обладают тем же специфичным свойством к индукции IgE-антител, что и компоненты натуральных экстрактов и обычно демонстрируют высокую чувствительность и специфичность в тестах in vitro и in vivo.

Сегодня множество аллергенных молекул из различных натуральных источников аллергенов могут быть клонированы, секвинированы и экспрессированы как рекомбинантные аллергены.

Использование рекомбинантных аллергенов позволяет выявить сенсибилизацию к компонентам ( специфичным белкам).
Таким образом, использование рекомбинантных аллергенов – это важная информация о триггерных стимулах на молекулярном уровне.

Исследование реактивности к рекомбинантным аллергенам дает возможность изучать более сложные популяционные явления, такие как географические различия в IgE-опосредованной чувствительности и перекрестные реакции между различными аллергенами.

Зачем это необходимо

• В случае, когда в натуральном экстракте содержание аллергенных компонентов низкое, дополнение основного рекомбинантного белка к экстракту улучшает клиническую чувствительность и количественную постановку теста.

• Рекомбинантные аллергены могут быть объединены для формирования композиции, содержащей оптимальное соотношение основных аллергенных компонентов из натурального экстракта, и исключающих компоненты, имеющие малое диагностическое значение. Это открывает интересные возможности для улучшения качества тестов в будущем.

• Использование тестов на отдельные аллергенные компоненты дополняют традиционные тесты на IgE антитела с целью получения более детальной информации. Возможность исследовать чувствительность к отдельным компонентам аллергена может пролить свет на необъяснимые явления.

• Тестирование с отдельными компонентами используется для более подробного исследования и объяснения аллергической реактивности, а также для определения перекрестной реактивности к различным аллергенам.

Что такое перекрестная аллергия и для чего это нужно

Для пациентов, у которых появляются симптомы после употребления в пищу яблока или других фруктов, обычный тест, основанный на применении экстракта, будет выявлять причиннозначимый аллерген, такой как яблоко, персик, груша.

Однако истинной причиной может быть сенсибилизация к пыльце деревьев или трав, перекрестная реакция между компонентами аллергенов, имеющими одинаковую структуру и представленными в пыльце растений и пищевых белках.

Тесты на отдельные аллергеные компоненты могут быть использованы для получения большей информации о причине сенсибилизации на молекулярном уровне, например, к молекулам пыльцы, LTPs или профилинам, и делает возможным сделать выводы врачам о клинических проявлениях.

Так как у пациентов, реагирующих на пыльцу, симптомы проявляются только в определенный сезон, то симптоматическое лечение в период цветения может быть эффективно, а для пациентов чувствительных к LTP еще обязательно необходима элиминационная диета. К тому же у этих пациентов, вероятно, разовьются более тяжелые симптомы.

Вот объяснение почему ребенок у которого была аллергия к латексной соске со временем дал реакцию на банан или авокадо – наличие рекомбинатных аллергенов ( перекрестная чувствительность, один и тот же по структуре белок аллерген)

Более точный ответ нужна ли СИТРекомбинантные аллергены дают возможность высокоспецифической диагностики, с помощью которой возможно определить объективные критерии для назначения специфической иммунотерапии (СИТ).

Тесты с рекомбинантными аллергенами открывают новые возможности прогнозирования, будет ли назначение СИТ эффективным или нет, и назначения адекватной терапии. Если аллергические реакции у пациента обусловлены сенсибилизацией к основному компоненту аллергена.

С высокой степенью вероятности можно прогнозировать высокий терапевтический эффект от СИТ с экстрактом пыльцы березы, который будет содержать высокую концентрацию этого компонента.

С другой стороны, если пациент чувствителен к другому, не к главному компоненту аллергена иммунотерапия с экстрактом, возможно будет недостаточно эффективной. Есть также опасения, что СИТ с аллергенными компонентами, к которым пациент не чувствителен, может вызвать развитие новой сенсибилизации, что скорее ухудшит симптомы, чем устранит их.

Мониторинг терапии

Иммунологический эффект от проведения СИТ может быть прослежен периодическипо уровню IgE- и IgG – антител к основным рекомбинантным аллергенам. Более того, проведение мониторинга может отследить развитие сенсибилизации к минорным

перекрестно –реагирующим компонентам экстракта.

Компонентная аллергодиагностика – новые подходыРекомбинантные аллергены открывают большие перспективы диагностики к молекулярным компонентам.

С их помощью возможно определение сенсибилизации пациента к полному аллергенному профилю, включающему как аллергенные

компоненты, вызывающие заболевание, так и перекрестно-реагирующие.

Компонентная аллергодиагностика – революционное направление аллергологии.

Разработки в области исследования реактивности к рекомбинантным аллергенам, проводились в компании Phadia в течение многих лет. В испытаниях использовали,как очищенные натуральные аллергенные компоненты, так и рекомбинантные аллергены.

 Более 10 лет назад были запущены исследования с первыми рекомбинантными

аллергенами, после чего количество компонентов для диагностики in vitro неуклонно растет.

Ученые активно разрабатывают новые рекомбинантные аллерготесты, исследуют их клиническую значимость и ищут пути их применения.

Источник: http://allergiya.com.ua/rekombinantnye-allergeny/

Аллергокомпонент t215 – Береза rBet v1 PR-10, IgE (ImmunoCAP)

Рекомбинантный аллерген

[21-681] Аллергокомпонент t215 – Береза rBet v1 PR-10, IgE (ImmunoCAP)

2595 руб.

Количественное определение в крови специфических антител класса иммуноглобулинов E к главному (“мажорному”) аллергену пыльцы березы – Betv1 белку PR-10, выявление которых позволяет диагностировать истинную аллергию к пыльце березы, оценить перекрестную реактивность с аллергенами других растений и пищевых продуктов, прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии.

Синонимы русские

Специфические иммуноглобулины класса Е к мажорному аллергену пыльцы березы Betv1 PR-10.

Синонимы английские

ImmunoCAP t215 (Birch, rBet v1 PR-10), IgE; Silver Birch recombinant (rBet v1 PR-10) IgE Ab in Serum; Silver Birch (rBet v1 PR-10) IgE.

Метод исследования

Иммунофлюоресценция на твердой фазе (ImmunoCAP).

Единицы измерения

kU/l (килоединица на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную или капиллярную кровь.

Общая информация об исследовании

Аллерген – это вещество, вызывающее аллергическую реакцию. При атопических заболеваниях аллергены стимулируют образование антител класса IgE и являются причинными факторами развития клинических симптомов аллергических заболеваний.

Выявление в крови специфических иммуноглобулинов Е к определенному аллергену подтверждает его роль в развитии аллергической реакции I типа (реагиновой), а значит, позволяет определить возможного “виновника” аллергии и назначить соответствующие лечебные и профилактические мероприятия.

Однако в состав аллергенного вещества входит не один, а несколько белковых структур, которые могут выступать аллергенами. Одни являются “мажорными” -основными аллергенами, другие “минорными” – второстепенными. Определение антител к рекомбинантным аллергенам позволяет выявить ведущий компонент в составе сложных аллергенов на уровне молекулярной аллергологии.

Это позволяет дифференцировать истинную и перекрестную аллергию.

Применение рекомбинантных аллергенов представляет собой новый инструмент в диагностике аллергических реакций I типа, который позволяет получить подробную информацию о сенсибилизации пациента, перекрестной реактивности с другими аллергенами, обосновать целесообразность и прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ).

Пыльца березы является основным и наиболее распространенным триггером аллергических реакций в весенний период, которые проявляются аллергическим ринитом, конъюнктивитом, обострениями бронхиальной астмы и атопического дерматита, симптомами орального аллергического синдрома.

При аллергологическом тестировании обычно определяется сенсибилизация к пыльце березы, как сложному аллергену, который одновременно включает в себя несколько аллергенных компонентов (Betv 1, Betv 2, Betv 3, Betv 4, Betv 5, Betv 6, Betv 7).

  Определение специфических антител IgE к отдельным аллергенным молекулам, рекомбинантным аллергенам, полученным методом генной инженерии позволяет дифференцировать истинную сенсибилизацию и перекрестную реактивность.

Особенно важно учитывать это при планировании АСИТ с аллергенами пыльцы березы, поскольку она может быть эффективной только при истинной аллергии. 

Истинная аллергия к пыльце березы подтверждается наличием в крови специфических антител IgE к аллергокомпоненту Betv1 – белку PR-10, рибонуклеазе, патогенетически связанному с развитием сенсибилизации к пыльце березы протеину. IgE-антитела к аллергену Betv1 выявляются у более 95 % пациентов, сенсибилизированных к пыльце березы.

PR-10 – термолабильный белок, аллергенные свойства которого снижаются после термической обработки, а также при распаде в пищеварительном тракте.

Структура PR-10 гомологична белкам пыльцы других деревьев из семейств Березовых, Буковых, Ореховых и таксономически связанных фруктов (яблоки, абрикосы, персики, черешня), овощей (морковь, сельдерей) и специй.

Ввиду вышеуказанного, у лиц, сенсибилизированных к белку PR-10, кроме респираторных симптомов на пыльцу нередко при употреблении в пищу фруктов, некоторых овощей, орехов наблюдаются локальные проявления аллергии – оральный аллергический синдром в виде зуда, жжения, отека, покраснения в ротовой полости.

Целью данного исследования является определение специфических IgE к рекомбинантному аллергену пыльцы березы rBetv1 методом ImmunoCAP.

Аллергодиагностика технологией ImmunoCAP характеризуется высокой точностью и специфичностью, что достигается обнаружением в очень малом количестве крови пациента низких концентраций IgE-антител.

Исследование основано на иммунофлюоресцентном методе, что позволяет увеличить чувствительность в несколько раз по сравнению с другими диагностическими методами. Во всем мире до 80 % определений специфических иммуноглобулинов IgE выполняется данным методом.

Всемирная Организация Здравоохранения и Всемирная Организация Аллергологов признают диагностику с использованием ImmunoCAP как “золотой стандарт”, так как эта методика доказала свою точность и стабильность результатов в независимых исследованиях.

Для чего используется исследование?

  • Дифференциальная диагностика истинной аллергии к пыльце березы и аллергических реакций, обусловленных перекрестной реактивности с другими аллергенами растительного происхождения;
  • выявление сенсибилизации к главному аллергену пыльцы березы у пациентов с аллергией на пыльцу деревьев и трав и/или поливалентной сенсибилизацией;
  • определение возможных причин перекрестной реактивности между аллергенами различных растений и продуктов растительного происхождения;
  • решение вопроса о целесообразности проведения и прогнозирование эффективности аллергенспецифической терапии (АСИТ) с аллергенами пыльцы березы.

Когда назначается исследование?

  • При обследовании пациентов, сенсибилизированных к пыльце березы и других деревьев;
  • при обследовании пациентов с поливалентной сенсибилизацией к аллергенам растительного происхождения;
  • при планировании АСИТ с аллергенами пыльцы березы.

Что означают результаты?

Референсные значения:

Значение показателякЕдА/лКлассУровень аллергенспецифических антител IgE
0 – 0,350Отсутствует
0,351 – 0,691Низкий
0,70 – 3,492Средний
3,5 – 17,493Высокий
17,5 – 49,994Очень высокий
50,0 – 100,05Насыщенно высокий
Больше 100,06Крайне высокий

Причины положительного результата:

  • сенсибилизация к главному аллергену пыльцы березы.

При выявлении сенсибилизации к аллергену Betv1 и отсутствием IgE-антител к аллергенам Betv2 и Betv4 высокая вероятность успешной АСИТ.

У пациентов с истинной аллергией на пыльцу березы (наличием IgE-антител к Betv1) и одновременной сенсибилизацией к минорным аллергенам Betv2 и Betv4 вероятность успешной АСИТ снижается.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие сенсибилизации к данному аллергену;
  • длительное ограничение или исключение контакта с аллергеном;
  • успешное проведение АСИТ.

При отсутствии сенсибилизации к Betv 1 АСИТ с аллергенами пыльцы березы будет неэффективной.

Важные замечания

  • Выполнение данного исследования безопасно для пациента по сравнению с кожными тестами (in vivo), так как исключает контакт пациента с аллергеном. Прием антигистаминных препаратов и возрастные особенности не влияют на качество и точность исследования.

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений) [08-017] Суммарные иммуноглобулины E (IgE) в сыворотке [21-673] Аллергочип ImmunoCAP ISAC (112 аллергокомпонентов)  [40-442] Аллергологическое обследование при астме/рините [21-657] Аллерген t3 – береза бородавчатая, IgE (ImmunoCAP) [21-665] Смесь аллергенов деревьев tx5 (ImmunoCAP), IgE: ольха серая, лещина, вяз, ива, тополь [21-664] Смесь аллергенов злаковых трав gx1 (ImmunoCAP), IgE: ежа сборная, овсяница луговая, плевел, тимофеевка луговая, мятлик луговой [21-670] Смесь аллергенов сорных трав wx3 (ImmunoCAP), IgE: полынь, подорожник ланцетовидный, марь, золотарник, крапива двудомная

+ определение специфических иммуноглобулинов класса E к прочим аллергенам

Кто назначает исследование?

Аллерголог, пульмонолог, оториноларинголог, дерматолог, гастроэнтеролог, педиатр, терапевт, врач общей практики.

Литература

  1. Mothes N, Valenta R. Biology of tree pollen allergens. Curr Allergy Asthma Rep 2004;4(5):384-90.
  2. Rossi RE, Monasterolo G, Monasterolo S. Detection of specific IgE antibodies in the sera of patients allergic to birch pollen using recombinant allergens Bet v 1, Bet v 2, Bet v 4: evaluation of different IgE reactivity profiles. Allergy 2003 ;58(9):929-32.
  3. Kazemi-Shirazi L, Niederberger V, Linhart B, Lidholm J, Kraft D, Valenta R. Recombinant marker allergens: diagnostic gatekeepers for the treatment of allergy. Int Arch Allergy Immunol 2002;127(4):259-68.
  4. Valenta R, Duchene M, Pettenburger K, Sillaber S, Valent P. Identification of profilin as a novel pollen allergen; IgE autoreactivity in sensitized individuals. Science 1991;253:557-60.

Источник: https://helix.ru/kb/item/21-681

Приложение N 2. Рекомендации по применению аллергена туберкулезного рекомбинантного в стандартном разведении (раствора для внутрикожного введения)

Рекомбинантный аллерген

Приказом Минздравсоцразвития РФ от 29 октября 2009 г. N 855 настоящее приложение дополнено приложением N 2

Приложение N 2
к Инструкции по применению
туберкулиновых проб

Рекомендации
по применению аллергена туберкулезного рекомбинантного в стандартном разведении (раствора для внутрикожного введения)

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении (далее – препарат) представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT.

Препарат содержит два связанных между собой антигена – CFP10 и ESAT6, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis. Эти антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.

bovis, из которого готовятся вакцины туберкулезные – БЦЖ и БЦЖ-М.

Одна доза (0,1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 (0,2 мкг), фенол (0,25 мг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций – до 0,1 мл.

Биологические и иммунологические свойства.

Препарат предназначен для повышения качества диагностики туберкулезной инфекции. Действие препарата основано на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для микобактерий туберкулеза (далее – МБТ) антигены.

Препарат не обладает сенсибилизирующим действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (далее – ГЗТ).

По результатам проведенных исследований установлено, что чувствительность (частота положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией) внутрикожной пробы с препаратом сопоставима с чувствительностью туберкулиновой пробы, а его специфичность (частота отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц) выше, чем у туберкулина, так как в отличие от туберкулина у вакцинированных БЦЖ, но не инфицированных МБТ лиц, препарат не вызывает ответную реакцию ГЗТ. В связи с тем, что препарат не вызывает реакцию ГЗТ, связанную с вакцинацией БЦЖ, проба с препаратом не может быть использована вместо туберкулинового теста для отбора лиц на первичную вакцинацию и ревакцинацию БЦЖ.

Препарат используется во всех возрастных группах с целью:

1) диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2) дифференциальной диагностики туберкулеза;

3) дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа);

4) наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Назначение.

Для практического использования внутрикожную пробу с препаратом применяют в противотуберкулезных учреждениях или, при отсутствии таковых, по назначению врача-фтизиатра и при его методическом обеспечении.

Для раннего выявления туберкулеза внутрикожную пробу с препаратом проводят:

лицам, направленным в противотуберкулезное учреждение для дообследования на наличие туберкулезного процесса;

лицам, относящимся к группам высокого риска по заболеванию туберкулезом с учетом эпидемиологических, медицинских и социальных факторов риска;

лицам, направленным к фтизиатру по результатам массовой туберкулинодиагностики.

Факторами высокого риска заболевания туберкулезом являются:

1) эпидемиологические (контакт с больным туберкулезом человеком или животным);

2) медико-биологические:

сахарный диабет, язвенная болезнь, психоневрологическая патология, частые ОРВИ в анамнезе;

хронические заболевания различных органов и систем при торпидном, волнообразном течении и неэффективности традиционных методов лечения

длительный прием (более месяца) цитостатических, глюкокортикоидных препаратов, иммунодепрессантов;

ВИЧ-инфекция, перинатальный контакт у детей по ВИЧ-инфекции.

3) социальные:

алкоголизм, наркомания, пребывание в местах лишения свободы, безработица;

беспризорность детей и подростков, попадание детей в детские приюты, детские дома, социальные центры и т.д.;

миграция.

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и других заболеваний внутрикожную пробу с препаратом проводят в комплексе с клинико-лабораторным и рентгенологическим обследованием в условиях противотуберкулезного учреждения.

Для наблюдения за пациентами, состоящими на учете у фтизиатра с различными проявлениями туберкулезной инфекции в условиях противотуберкулезного учреждения (все контингенты ПТД) внутрикожную пробу с препаратом проводят при контрольном обследовании во всех группах диспансерного учета с интервалом 3-6 месяцев.

Способ применения и дозировка.

Назначение и методическое руководство проведением пробы осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов.

Препарат вводят строго внутрикожно. Для проведения пробы применяют только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности.

Запрещается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.

Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом. Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет использован для инъекции (СП 3.3.2342-08 от 03.03.

2008) Если туберкулиновые шприцы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для подкожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препарата в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой.

Туберкулиновым шприцем набирают 0,2 мл (две дозы) препарата, и выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в защищенном от света месте.

Пробу проводят обследуемым в положении сидя.

После обработки участка кожи на внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние слои натянутой кожи, параллельно ее поверхности, вводят 0,1 мл препарата.

При постановке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде “лимонной корочки” беловатого цвета диаметром 7-10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкулином, препарат вводят в другое предплечье.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее).

Учет и интерпретация результатов.

В учетных документах после постановки пробы с препаратом отмечают:

а) название препарата;

б) предприятие-изготовитель, номер серии, срок годности;

в) дату проведения пробы;

г) результат – реакция на пробу.

Результат пробы оценивает врач или обученная медсестра через 72 часа с момента ее проведения путем измерения поперечного (по отношении к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.

Ответная реакция на пробу считается:

отрицательной – при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии “уколочной реакции”;

сомнительной – при наличии гиперемии без инфильтрата;

положительной – при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

Условно различают следующие ответные кожные реакции на препарат:

слабо выраженная – при наличии инфильтрата размером до 5 мм.

умеренно выраженная – при размере инфильтрата 5-9 мм;

выраженная – при размере инфильтрата 10 мм и более;

гиперергическая – при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата.

В отличие от реакции ГЗТ, кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48-72 ч обычно исчезают.

Отрицательная реакция на пробу.

Кожная ГЗТ к препарату, как правило, отсутствует:

1) улиц, не инфицированных МБТ;

2) у лиц, ранее инфицированных МБТ с неактивной туберкулезной инфекцией.

3) у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4) у лиц, излечившихся от туберкулеза.

Одновременно проба с препаратом может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования МБТ, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием. В связи с этим при наличии характерных клинико-рентгенологических признаках туберкулеза отрицательная реакция на препарат не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулезной инфекции.

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

Лица старше 18 лет, у которых впервые установлена сомнительная или положительная проба с препаратом, подлежат полному клинико-рентгенологическому обследованию в противотуберкулезном диспансере.

По итогам обследования, при отсутствии у указанной группы лиц признаков локального туберкулеза, им показано наблюдение у фтизиатра по “0” группе диспансерного учета с проведением лечебно-профилактических мероприятий (по показаниям).

Детям и подросткам при наличии сомнительной или положительной реакции на препарат показано полное обследование на туберкулез с последующим лечением и наблюдением в соответствующей группе диспансерного учета. При отрицательном результате реакции на препарат лечение по поводу туберкулезной инфекции не показано. Повторная постановка пробы – через 2 месяца.

Противопоказания для постановки пробы:

1) острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания за исключением случаев подозрительных на туберкулез;

2) соматические и др. заболевания в период обострения;

3) распространенные кожные заболевания;

4) аллергические состояния;

5) эпилепсия.

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

В случаях дифференциальной диагностики локального туберкулеза и других заболеваний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, противопоказаний для постановки пробы с препаратом не имеется.

Побочное действие.

У отдельных лиц, как и при проведении туберкулинодиагностики, могут наблюдаться кратковременные признаки общей неспецифической реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

Взаимодействие с другими лекарственными препаратами.

Здоровым лицам с отрицательным результатом пробы профилактические прививки (кроме БЦЖ) можно проводить непосредственно после оценки и учета результата пробы.

Если профилактические прививки уже проведены, то пробу с препаратом осуществляют не ранее, чем 1 месяц после прививки.

Источник: https://base.garant.ru/4179360/ede8b16cd6c45b7d50eee15d6e28ef85/

Рекомбинантные аллергены

Рекомбинантный аллерген

Тесты с рекомбинантными аллергенами, которые носят название молекулярная диагностика аллергии, открывают новые возможности прогнозирования, в плане целесообразности назначения АСИТ и ее эффективности, а также в вопросе выявления перекрестной аллергии и точной постановке диагноза.

Рекомбинантные аллергены – это отдельные, синтетически созданные белки, которые входят в состав белковых молекул окружающих нас аллергенов. Они очищены от любых других белков, что обеспечивает высокую точность результата при постановке теста с ними.

По своим характеристикам разделяются на:

  • мажорные (главные) аллергены (белки) – это обычно видоспецифические белки (т.е. по ним можно определить к какой группе растений принадлежит данный белок). Обычно они устойчивые к нагреванию и более крупные по размеру, а также содержатся в данном аллергене в большем количестве.
  • минорные (второстепенные) аллергены (белки) – это обычно белки, которые меньше по размеру и количеству. Они часто встречаются одновременно в нескольких аллергенах и именно из-за них развивается перекрестная аллергия. Например: белок клещей домашней пыли – тропомиозин Der p 10 – входит в состав белков не только клещей, но и ракообразных, тараканов, аскарид. По – этому, при развитии сенсибилизации к данному белку, у пациента будет наблюдаться не только заложенность носаи кашель на пыль, содержащей клещи, но и реакция на ракообразные, морепродукты (возможно в виде крапивницы или отека Квинке).

1. ! Эффективность АСИТ будет высокой: при повышенном уровне IgЕ на мажорные белки и при отсутствии антител на минорные белки.

2. При повышенном уровне IgЕ одновременно на мажорные и минорные белки – эффективность АСИТ может быть не достаточно эффективной.

3. При повышенном уровне IgЕ на минорные белки и отсутствии антител на мажорные белки аллергена – АСИТ на этот аллерген проводить не рекомендуется, а так же необходимо провести дообследование пациента дальше с целью выявления основного аллергена.

В лаборатории клиники «ФОРПОСТ» проводятся тесты на все рекомбинантные аллергены, необходимые для определения эффективности АСИТ:

  • мажорные белки на деревья (rBet v1)
  • минорные белки на деревья (rBet v2, rBet v4)
  • мажорные белки на луговые и газонные травы (rPhl p1, rPhl p5b)
  • минорные белки на луговые и газонные травы (rPhl p7, rPhl p12)
  • мажорные белки на сорные травы (nAmb a1, nArt v3)
  • мажорные белки на клещей домашней пыли (nDer p1, nDer p2)
  • минорные белки на клещей домашней пыли (rDer p10)
  • мажорные белки на домашних животных (nCan f1, nFel d1)
  • мажорные белки на различные виды плесени (наружной и внутренней).

Возможно проведение тестов как в виде комплексов, так и на отдельно взятый аллерген.

Аллерго панель «Поллиноз – молекулярная диагностика»

  1. Главный аллерген – компонент деревьев (r Bet v1)
  2. Минорный аллерген – компонент деревьев (r Bet v2, r Bet v4)
  3. Главный аллерген – компонент трав (r Phl p1, r Phl p5b)
  4. Минорный аллерген – компонент трав (r Phl p7, r Phl p12)
  5. Главный аллерген – компонент амброзии (n Amb a1)
  6. Полынь
  7. Минорный аллерген – компонент полыни (n Art v1)
  8. Триптаза (маркер анафилаксии)

Аллерго панель «Круглогодичный ринит – подготовка к АСИТ»

  1. Клещ домашней пыли (dermatophagoides farinae или dermatophagoides pteronyssinus)
  2. Минорный аллерген – компонент клещей домашней пыли (r Der p10)
  3. Смесь плесеней (Penicillinum notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria alternaria, Candida albicans)
  4. Стафилококковый энтеротоксин
  5. Кошка или собака (на выбор)
  6. Смесь продуктов (белок яйца, молоко, рыба, пшеница, арахис, соя)
  7. Триптаза (маркер анафилаксии)

Аллерго панель «Плесень»

  1. Плесень на продуктах (Penicillinum notatum)
  2. Плесень помещений (Aspergillus fumigatus)
  3. Плесень наружная (Alternaria alternaria)
  4. Плесень кожи и слизистых (Candida albicans)
  5. Плесень растений (Cladosporium herbarum)

Аллерго панель «Универсальная»

  1. Фадиатоп
  2. Клещ домашней пыли (dermatophagoides farinae или dermatophagoides pteronyssinus)
  3. Смесь плесеней (Penicillinum notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria alternaria, Candida albicans)
  4. Стафилококковый энтеротоксин
  5. Кошка или собака (на выбор)
  6. Смесь продуктов (белок яйца, молоко, рыба, пшеница, арахис, соя)
  7. Микст аллергенов цитрусовых (апельсин, лимон, грейпфрут, мандарин)
  8. Главный аллерген – компонент деревьев (r Bet v1)
  9. Главный аллерген – компонент трав (r Phl p1, r Phl p5b)
  10. Минорный аллерген – компонент трав (r Phl p7, r Phl p12)
  11. Амброзия

Аллерго панель «Диагностика аллергии у детей школьного возраста»

  1. Клещ домашней пыли (dermatophagoides farinae или dermatophagoides pteronyssinus)
  2. Смесь плесеней (Penicillinum notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria alternaria, Candida albicans)
  3. Стафилококковый энтеротоксин
  4. Кошка или собака (на выбор)
  5. Главный аллерген – компонент деревьев (r Bet v1)
  6. Главный аллерген – компонент трав (r Phl p, r Phl p5b)
  7. Полынь
  8. Казеин молока
  9. Овомукоид яйца

Аллерго панель «Диагностика аллергии у детей дошкольного возраста»

  1. Казеин молока
  2. Овомукоид яйца
  3. Соя
  4. Козье молоко
  5. Микст аллергенов мяса
  6. Микст аллергенов фруктов
  7. Стафилококковый энтеротоксин

Аллерго панель «Медикаментозная аллергия – антибиотики»

  1. Ампицилин
  2. Амоксицилин
  3. Цефаклор
  4. Триптаза (маркер анафилаксии)

Аллерго панель «Хроническая крапивница»

  1. Фадиатоп
  2. Смесь продуктов (белок яйца, молоко, рыба, пшеница, арахис, соя)
  3. Аскарида (IgE)
  4. Анизакида (IgE)
  5. Эхинококк (IgE)
  6. Смесь плесеней (IgE) (Penicillinum notatum, Cladosporium herbarum, Aspergillus fumigatus, Alternaria alternaria, Candida albicans)
  7. Стафилококковый энтеротоксин
  8. Целиакия (IgG к трансглутаминазе и IgG к глиадину)

Источник: https://forpost.ua/stati/rekombinantnye-allergeny/

Новые возможности с рекомбинантными аллергенами

Рекомбинантный аллерген

Диагностические инструменты будущего уже сейчас

Современные технологии позволяют не только определить структуру аллергенных протеинов, но и получить их в больших количествах с использованием методов генной инженерии.

Рекомбинантные аллергены могут точно соответствовать нативной структуре без каких-либо генетических и биологических отклонений.

Использование рекомбинантных аллергенов в тестах in vitro открывает новые возможности для создания более качественных тестов и предлагает новые инструменты для решения клинических и иммунологических вопросов.

Рекомбинантные аллергены открывают новые перспективы для диагностики IgE

опосредованных реакций. В составе специфических аллергенов, например, пыльцы березы, сейчас возможно также идентифицировать наиболее активные белковые компоненты, вызывающие индукцию IgE антител и аллергические симптомы.

Таким образом, тесты in vitro, с использованием рекомбинантных аллергенов – это важная информация о триггерных стимулах на молекулярном уровне.

Исследование реактивности к рекомбинантным аллергенам дает возможность изучать более сложные популяционные явления, такие как географические различия в IgE-опосредованной чувствительности и перекрестные реакции между различными аллергенами.Традиционный тест на аллергию выявляет источник аллергена, например, пыльцу березы. Но этот

сложный аллерген включает несколько аллергенных компонентов. Компоненты аллергена пыльцы березы

Белки Общее название Биологическая функция Молекулярная масса(кДа)

Bet v 1 PR-10 protein Патогенреактивный протеин 17

Bet v 2 Профилин Актин-связывающий протеин 15

Bet v 3 4 EF- кальций связывающий белок Кальций-связывающий

протеин 23

Bet v 4 2-ЕF- кальций связывающий белок,полькальцинКальцийсвязывающий протеин

8

Bet v 6 Изофлавоновая редуктаза Изофлавоновая

редуктаза

34

Bet v 7 Циклофилин

Пептидилпролил

изомераза

18 Использование

рекомбинантных аллергенов позволяет выявить сенсибилизацию к компонентам

(специфичным белкам). Усовершенствованные аллерготесты

Повышение клинической чувствительности натуральных компонентов

В случае, когда в натуральном экстракте содержание аллергенных компонентов низкое,

дополнение основного рекомбинантного белка к экстракту улучшает клиническую

чувствительность и количественную постановку теста. Эту стратегию ранее

использовали в компании Phadia с большим успехом для создания улучшенного аллергена ImmunoCap Allergen Latex k82(латекса), когда в испытании были выявлены все сенсибилизированные к латексу пациенты.

Рекомбинантные аллергены могут быть объединены для формирования композиции,

содержащей оптимальное соотношение основных аллергенных компонентов из

натурального экстракта, и исключающих компоненты, имеющие малое диагностическое

значение. Это открывает интересные возможности для улучшения качества тестов

в будущем.Использование тестов на отдельные аллергенные компоненты дополняют

традиционные тесты на IgE антитела с целью получения более детальной информации.

Возможность исследовать чувствительность к отдельным компонентам аллергена может

пролить свет на необъяснимые явления:

Объяснение географических различий в клинических реакциях

Известно, что в северной части Европы аллергия на фрукты и овощи проявляется

по типу синдрома оральной аллергии, ощущением зуда и першения в ротовой

полости и глотке, в то время как, пациенты южной Европы чаще имеют системные

симптомы. Объясняется это сенсибилизацией к различным протеинам. Тестирование с

рекомбинантными компонентами показало, что сенсибилизация к Bet v 1 по всей

вероятности вызывается пыльцой березы, доминирующей на севере. В южной части

и других регионах антитела к липидному трансферпротеину (LTP) – доминируют,

что указывает на превалирование истинной пищевой аллергии.

Объяснение клинической реактивности для улучшения рекомендаций пациентам

Тестирование с отдельными компонентами используется для более подробного

исследования и объяснения аллергической реактивности, а также для определения

перекрестной реактивности к различным аллергенам. Для пациентов, у которых появляются симптомы после употребления в пищу яблока или других фруктов, обычный тест, основанный на применении экстракта, будет выявлять причиннозначимый аллерген, такой как яблоко, персик, груша.

Однако истинной причиной может быть сенсибилизация к пыльце деревьев или трав, перекрестная реакция между компонентами аллергенов, имеющими одинаковую структуру и представленными в пыльце растений и пищевых белках.

Тесты на отдельные аллергеные компоненты могут быть использованы для получения большей информации о причине сенсибилизации на молекулярном уровне, например, к молекулам пыльцы, LTPs или профилинам, и делает возможным сделать

выводы врачам о клинических проявлениях. Так как у пациентов, реагирующих на пыльцу, симптомы проявляются только в определенный сезон, то симптоматическое лечение в период цветения может быть эффективно, а для пациентов чувствительных к LTP необходима элиминационная диета. У этих пациентов, вероятно, разовьются более тяжелые симптомы.

Рекомбинантные аллергены дают возможность высокоспецифической диагностики, с помощью которой возможно определить объективные критерии для назначения специфической иммунотерапии (СИТ).

Определение сенсибилизирующего профиля перед назначением терапии

Тесты с рекомбинантными аллергенами открывают новые возможности прогнозирования, будет ли назначение СИТ эффективным или нет, и назначения адекватной терапии.

Если аллергические реакции у пациента обусловлены сенсибилизацией к основному компоненту аллергена (например, Bet v 1 пыльцы березы), с высокой степенью вероятности можно прогнозировать высокий терапевтический эффект от СИТ с экстрактом пыльцы березы, который будет содержать высокую концентрацию этого компонента.

С другой стороны, если пациент чувствителен к другому, не к главному компоненту аллергена (например, к Bet v 2 или Bet v 4 пыльцы березы), иммунотерапия с

экстрактом, возможно, содержащим Bet v 1 будет недостаточно эффективной. Есть

также опасения, что СИТ с аллергенными компонентами, к которым пациент не

чувствителен, может вызвать развитие новой сенсибилизации, что скорее ухудшит симптомы, чем устранит их.

Мониторинг терапии

Иммунологический эффект от проведения СИТ может быть прослежен периодически

по уровню IgE- и IgG – антител к основным рекомбинантным аллергенам. Более того,

проведение мониторинга может отследить развитие сенсибилизации к минорным

перекрестно –реагирующим компонентам экстракта. Компонентная аллергодиагностика –

новые подходы

Рекомбинантные аллергены открывают большие перспективы диагностики к

молекулярным компонентам. С их помощью возможно определение сенсибилизации

пациента к полному аллергенному профилю, включающему как аллергенные

компоненты, вызывающие заболевание, так и перекрестно-реагирующие. Компонентная

аллергодиагностика – революционное направление аллергологии. Что такое рекомбинантные

аллергены?

Рекомбинантные аллергены – это аллергенные молекулы, полученные

методом генной инженерии, первоначально выделенные из аллергенного экстракта. Большинство существующих рекомбинантных аллергенов экспрессированы в клетке

Esherichia coli, и по своим структурным и иммунологическим свойствам

полностью соответствуют натуральным протеинам. Другие высокотехнологические

системы основаны на воспроизведении рекомбинантных аллергенов в дрожжевой,

бактериальной или инсектной клетке.Рекомбинантные аллергены обладают

тем же специфичным свойством киндукции IgE-антител, что и компоненты

натуральных экстрактов и обычно демонстрируют высокую чувствительность

и специфичность в тестах in vitro и in vivo. Сегодня множество аллергенных молекул

из различных натуральных источников аллергенов могут быть клонированы,

секвинированы и экспрессированы как рекомбинантные аллергены. Литература:

1. Asero R et al. Plant Food Allergies: A Suggested Approach

to Allergen-resolved Diagnosis in the Clinical Practice by

Identifying Easily Available Sensitization Markers. Int Arch

Allergy Immunol 2005;138:1-11.

2. Asero R et al. Immunological cross-reactivity between lipid

transfer proteins from botanically unrelated plant-derived

foods: a clinical study. Allergy 2002;57:900-6.

3. Mari A et al. The oral allergy syndrome: improved diagnostic

and treatment methods. Curr Opin Allergy Clin Immunol

2005;5:267-273

4. Valenta R et al. The recombinant allergen-based concept of

component-resolved diagnostics and immunotherapy

(CRD and CRIT). Clin Exp Allergy 1999;29:896-904.

5. Kazemi-Shirazi L et al. Recombinant Marker Allergens:

Diagnostic Gatekeepers for the Treatment of Allergy.

Int Arch Allergy Immunol 2002;127:259-68.

6. Moverare R et al. Development of new IgE specificities to

allergenic components in birch pollen extract during specific

immunotherapy studied with immunoblotting and

Pharmacia CAP System™. Allergy 2002;57:423-30.

7. Jutel M et al. Allergen-specific immunotherapy with

recombinant grass pollen allergens. J Allergy Clin Immunol

2005;116:608-13.

8. Reisinger J et al. Allergen-specific nasal IgG antibodies

induced by vaccination with genetically modified allergens

are associated with reduced nasal allergen sensitivity.

Clin Immunol 2005;116:347-54.

Источник: https://www.BabyBlog.ru/user/nerika/3033490

Лечим24/7
Добавить комментарий